截止至2021年4月，国内19项干细胞药物临床试验申请（IND）获国家药品评审中心（CDE）受理，其中14项获得默许进入临床试验资格。

　　无论是以多层“细胞工厂”为代表的平皿制造工艺，还是生物反应器制造工艺，均有各自的局限性。规模化细胞制造工艺，不能只是简单考虑细胞扩增数量，更应该关注扩增后干细胞质量能否保持均一性。

　　平皿制备工艺可满足于中小规模的细胞生产需求，但存在人工成本高、生产空间需求大、细胞产品批次生产数量有限、批次间质量不稳定等问题，严重制约着干细胞产业化的发展。

　　生物反应器制备工艺，可作为细胞体外培养的平皿制备工艺替代品。主要有两类：以中空纤维生物反应器为代表的灌注式生物反应器和基于微载体的悬浮搅拌式生物反应器。

　　中空纤维生物反应器可用于贴壁细胞、悬浮细胞、细胞分泌物（外泌体等）的生产制备，一次运行可生产4-6×10*8 数量的间充质干细胞（MSCs）；但在贴壁细胞培养过程中，无法实时监测细胞增殖状态和质量情况，且收获过程面临着胰酶消化时间长，细胞的收获效率及质量都难以保障。

　　在搅拌悬浮式生物反应器中，干细胞通常附着在悬浮于搅拌容器中的微载体上。作为干细胞粘附培养介质，

　　微载体不仅要满足不同类型干细胞的粘附和增殖要求，还要考虑如何去除微载体，保证细胞治疗产品的安全性情况下进行细胞收获操作，且收获的细胞满足干细胞的基本生物学质量要求。

　　目前市场上销售的商业化微载体，绝大多数是以收获细胞表达产物为目标，不能满足细胞治疗企业以收获质量稳定、符合临床应用需求的细胞的目的。

　　是一款多孔微载体，其核心成分为动物源蛋白与交联剂固固化成外形为100-200µm 的多孔微球。

　　微载体原材料选用药用辅料级别并完成了第三方质量检测及安全性评价，3D TableTrix®微载片获得了国家药品审评中心（CDE）药用辅料资质备案

　　MSCs产品的生产工艺是从供者体内获取组织，经组织分离、克隆培养而形成均一的细胞群体，经质量鉴定符合间充质干细胞基本生物学特性的条件下建立原始细胞库/种子库

　　我们建议原始细胞库阶段仍采用传统的二维培养工艺，采用经全面质检合格的P2/P3代MSCs作为3D细胞培养工艺的种子细胞，接种到微载体上进行三维扩增培养。在接种起始细胞密度较低的情况下，可以选择较小规模的生物反应器

　　（如：125ml/500ml 3D FloTrix ® miniSPIN 灌流式生物反应器)

　　，随着细胞扩增数量的增加，进而逐级放大到中试规模（5L 3D FloTrix ®vivaSPIN 自动化生物反应器）及生产规模

　　微载体接种前是否需要经过称量、灭菌、溶胀等操作过程，经过这些操作过程的微载体如何进行质量控制；

　　细胞接种粘附到微载体上是静态接种，还是微载体悬浮搅拌过程中动态接种，如何保证细胞在微载体上的接种效率。

　　细胞是连续逐级扩增放大最终形成工作细胞库，还是在某个三维扩增体系节点建立主细胞库，进而再放大到工作细胞库；

　　在干细胞大规模扩增时如何监测细胞的增殖状况和质量，经三维扩增培养的细胞质量检验项目及标准如何设定。

　　根据不同组织来源的MSCs生长特性，华龛生物可定制化设计干细胞三维扩增培养工艺参数，不仅满足扩细胞数量的需求，更能满足细胞的质量

　　；细胞质量达到《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则（试行）2015》中关于干细胞制剂的质量控制标准，所有三维扩增工艺参数均经过反复验证以保证不同类型干细胞制备工艺的稳定性。

　　微载体能够显著提高细胞扩增数量，但并不建议为了追求细胞数量而在微载体上长时间培养。原因在于干细胞在培养过程中不断分泌各种黏附因子，微载体容易聚团。在细胞收获过程中，如果采用胰酶长时间消化细胞，将损伤干细胞的表面标记物，影响细胞活力，最终影响干细胞质量。

　　因此，如何将细胞从微载体上解离下来，又能保证细胞治疗产品的高质量，是干细胞大规模扩增工艺所必需考虑的问题。

　　，特异降解微载体材料，可实现全部干细胞的高效、温和收获，避免了传统胰酶消化液对干细胞的损伤。通过常规简单的清洗工艺，去除有害物质残留，符合干细胞制剂终产品的质量标准与安全性要求。

　　干细胞经过生物反应器的扩增培养，可一次性制备多达10*10-10*12个细胞。如何在短时间内同时收获大量细胞，这对于传统的人工收获和冻存工艺是一个严峻的挑战。

　　亦可实现原位冷冻保存，便于储存、运输和临床应用。微组织冻存与复苏后仍保持干细胞活性、功能及3D结构。复苏后的微组织既可以作为下一批干细胞制备工艺的“种子”继续连续扩增，同时也可以作为新型的3D干细胞微组织创新药物进行原位注射再生治疗。